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        elisa試劑盒白介素類實驗操作程序總結(jié)
        更新時間:2017-08-22   點擊次數(shù):1527次

        實驗開始前,各elisa試劑盒白介素類均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合elisa試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
        1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
        2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
        3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
        4.每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
        5.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
        6.依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
        7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
        8.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后立即進行檢測。的實驗操作elisa試劑盒白介素類程序總結(jié)
        1.準備試劑,樣品和標準品
        2.加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分鐘
        3.洗板5次,加入酶標試劑,37℃反應30分鐘
        4.洗板5次,加入顯色液A、B,37℃反應10分鐘
        5.加入終止液
        6.15分鐘之內(nèi)度OD值
        7.計算
        YSRIBIO226    Sodium Ascorbate     抗壞血酸鈉標準品    134-03-2     200mg    
        YSRIBIO227    Sodium Acetate (AS)    乙酸鈉標準品    127-09-3     1g    
        YSRIBIO228    Simvastatin     辛伐他汀標準品    79902-63-9     200mg    
        YSRIBIO229    Simethicone     二甲基硅油標準品    8050-81-5     50g    
        YSRIBIO230    Silydianin     水飛薊寧標準品    29782-68-1     20mg    
        YSRIBIO231    Silybin     水飛薊素標準品    22888-70-6     50mg    
        YSRIBIO232    Silver Sulfadiazine     磺胺嘧啶銀標準品    22199-08-2     200mg  
        elisa試劑盒白介素類  

         

         

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