PBS的清洗方式選擇、次數和時間的選擇？
 
單獨沖洗，防止交叉反應造成污染。
 
臨床上每天檢測的病例很多，所用的抗體種類及項目也多，如果在加入一抗孵育完后，將它們在一個缸內洗，這樣就會造成交叉污染，影響zui后的結果。正確的做法是單獨地進行沖洗，沖洗的PBS為一次性，保證切片沒有相互交叉污染的機會。ELISA試劑盒
 
溫柔沖洗，防止切片的脫落。
 
沖洗切片，取出切片，將PBS從上輕輕地沖洗，讓PBS自上而下流下來，不要拿起切片將PBS對準切片沖洗，這樣由于沖出的PBS有一定的沖擊力，很容易使切片周邊引起松動，導致切片的脫落。
 
沖洗的時間要足夠，才能*洗去結合的物質。
 
注意：沖洗切片有人提出用微振蕩器振染，振下未結合的各種物，使之不產生背景，此種做法一是浪費時間，二是很容易導致切片的脫落。切片的沖洗據實踐認為，用一小燒杯柔和地于切片上沖洗，就能*沖洗去未結合的物質，無需附加其它條件，沖洗好于切片上再注入PBS，持續2分鐘左右就*足夠了。
 
PBS的PH和離子強度的使用和要求。
 
劉彥仿指出：中性及弱鹼性條件（PH7－8）有利于免疫復合物的形成，而酸性條件則有利于分解；低離子強度有利于免疫復合物的形成，而高離子強度則有利于分解。［］免疫組化P56我們目前常用的PBS的PH在7.4-7.6濃度是0.01M，根據本室十幾年來的使用情況，認為該溶液價格便宜配制方面，使用效果好。ELISA試劑盒
 
常用試劑的配制和使用。
 
在免疫組織化學的染色過程中，用得zui多的試劑就是緩沖液，因為切片在整個染色中，抗體的加、換、切片的沖洗，DAB的配制都離不開緩沖液。ELISA試劑盒可見緩沖液在整個染色中都起至關鍵的作用，緩沖液的過酸或偏堿，都將影響染色的結果。