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        細胞復蘇的具體操作
        更新時間:2016-07-25   點擊次數:1591次

        細胞復蘇的具體操作:
        一. 實驗前準備:
        1.將水浴鍋預熱至37℃
        2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
        3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養瓶等等。
        二.取出凍存管:
        1.根據細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。
        2.從液氮罐中取出細胞盒,取出所需的細胞,同時核對管外的編號。
        三.迅速解凍:
        1.迅速將凍存管投入到已經預熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。
        2.約1-2min后凍存管內液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內。
        四.平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機中3000r/min 離心3min
        五.制備細胞懸液:
        1.吸棄上清液。
        2.向離心管內加入10ml培養液,吹打制成細胞懸液。
        六.細胞計數:細胞濃度以5×105/ml為宜。
        七.培養細胞將復合細胞計數要求的細胞懸液分裝入培養瓶內,將培養瓶放入37℃和5%CO2的培養箱內2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續培養培養,換液的時間由細胞情況而定

         

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