脫氫酶(DHA)測試盒

商品詳情：
脫氫酶(DHA)測試盒測定意義

脫氫酶(dehydrogenase, DHA) 是一類催化物質氧化還原反應的酶，催化底物通過細胞色素系統被氧化，釋放的能量供機體使用，是生物體取得能量的一種方式。

測定原理

在細胞呼吸過程中，氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在脫氫酶作用下接受氫以后，被還原為三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF)，TF呈現紅色，于485nm測定其吸光值，即得脫氫酶活性。

自備實驗儀器及用品

天平、恒溫培養箱或水浴鍋、低溫離心機、酶標儀、96孔板、冰、蒸餾水、甲醇(不允許快遞，請用戶自備)。
試劑組成和配制：

試劑一：液體×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體×1瓶，4℃保存。

試劑三：粉劑×1瓶（棕色），4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇，蓋緊后充分混勻，再加入9.333 mL蒸餾水混勻，避光保存。

試劑四：粉劑×1管，4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水，充分溶解。

標準品：粉劑×1瓶，臨用前加10 mL蒸餾水，充分溶解。1μmol/mL標準液，4℃避光保存。
商品屬性：

測定操作：

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min，調節波長到570 nm，蒸餾水調零。

2. 空白管：取EP管，加入10μL蒸餾水，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復顛倒EP管數次，于570nm測定吸光值，記為A空白管。顯色后務必在30min內測完。

3. 標準管：取EP管，加入10μL標準品，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復顛倒EP管數次，于570nm測定吸光值，記為A標準管。顯色后務必在30min內測完。

4. 測定管：取EP管，加入10μL上清液，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復顛倒EP管數次，于570nm測定吸光值，記為A測定管。顯色后務必在30min內測完。

注意：空白管和標準管只需要測定一次。

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