轉(zhuǎn)氫酶2測(cè)試盒

轉(zhuǎn)氫酶2測(cè)試盒

商品詳情：
測(cè)定意義：TH位于線粒體的內(nèi)膜上，又稱為線粒體復(fù)合體六，催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化，調(diào)節(jié)線粒體NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反應(yīng)稱為TH-2，催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。

測(cè)定原理：NADH和NADPH均在340nm有特征吸收，因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應(yīng)不能導(dǎo)致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+，TH-2催化APAD+還原生成APADH，APADH在375nm有特征光吸收，測(cè)定375nm光吸收的增加速率，來計(jì)算TH-2活性。需自備的儀器和用品：可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬。

角蛋白19ELISA試劑盒 KRT19免費(fèi)代測(cè)試劑

角蛋白17ELISA試劑盒 KRT17免費(fèi)代測(cè)試劑

角蛋白16ELISA試劑盒 KRT16免費(fèi)代測(cè)試劑

角蛋白15ELISA試劑盒 KRT15免費(fèi)代測(cè)試劑

角蛋白14ELISA試劑盒 KRT14免費(fèi)代測(cè)試劑

角蛋白13ELISA試劑盒 KRT13免費(fèi)代測(cè)試劑

角蛋白12ELISA試劑盒 KRT12免費(fèi)代測(cè)試劑

角蛋白10ELISA試劑盒 KRT10免費(fèi)代測(cè)試劑

焦磷酶2ELISA試劑盒 PPA2免費(fèi)代測(cè)試劑

焦磷酶1ELISA試劑盒 PPA1免費(fèi)代測(cè)試劑

膠質(zhì)細(xì)胞系來源神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α1ELISA試劑盒 GFRα1免費(fèi)代測(cè)試劑

膠質(zhì)細(xì)胞成熟因子γELISA試劑盒 MPFγ免費(fèi)代測(cè)試劑

膠乳素ELISA試劑盒 LXN免費(fèi)代測(cè)試劑

降鈣素受體ELISA試劑盒 CTR免費(fèi)代測(cè)試劑

腱調(diào)蛋白ELISA試劑盒 TNMD免費(fèi)代測(cè)試劑
轉(zhuǎn)氫酶2測(cè)試盒肌激酶(CK)測(cè)試盒50管/24樣

肌激酶(CK)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

肌激酶(CK)測(cè)試盒/微量法100T/96S

幾丁質(zhì)酶測(cè)試盒/比色法50T/24樣

幾丁質(zhì)酶測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣

幾丁質(zhì)酶測(cè)試盒/微量法100T/48S

己糖激酶(HK)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

己糖激酶(HK)測(cè)試盒/微量法100管/96樣

己糖激酶(HK)測(cè)試盒/紫外法48樣
注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。