淀粉分支酶(SBE)測(cè)試盒

商品詳情：
淀粉分支酶(SBE)測(cè)試盒測(cè)定意義

SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中，是參與支鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶，測(cè)定SBE活性在淀粉生物合成、優(yōu)質(zhì)農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義。

測(cè)定原理

淀粉和碘結(jié)合后在660nm有特征光吸收，SBE可切斷支鏈淀粉側(cè)支，從而降低了淀粉-碘復(fù)合物在660nm吸收值，一定時(shí)間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。

需自備的的儀器和用品

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。

鞘磷脂脂質(zhì)蛋白1ELISA試劑盒 PLP1免費(fèi)代測(cè)試劑

鞘磷脂磷二酯酶4ELISA試劑盒 SMPD4免費(fèi)代測(cè)試劑

鞘磷脂磷二酯酶3ELISA試劑盒 SMPD3免費(fèi)代測(cè)試劑

鞘磷脂合酶2ELISA試劑盒 SGMS2免費(fèi)代測(cè)試劑

鞘磷脂合酶1ELISA試劑盒 SGMS1免費(fèi)代測(cè)試劑

鞘磷脂蛋白0ELISA試劑盒 MPZ免費(fèi)代測(cè)試劑

鞘氨醇激酶2ELISA試劑盒 SPHK2免費(fèi)代測(cè)試劑

鞘氨醇激酶1ELISA試劑盒 SPHK1免費(fèi)代測(cè)試劑

橋尾蛋白ELISA試劑盒 GPHN免費(fèi)代測(cè)試劑

橋連整合因子3ELISA試劑盒 BIN3免費(fèi)代測(cè)試劑

橋連整合因子2ELISA試劑盒 BIN2免費(fèi)代測(cè)試劑

橋連整合因子1ELISA試劑盒 BIN1免費(fèi)代測(cè)試劑

橋粒芯糖蛋白4ELISA試劑盒 DSG4免費(fèi)代測(cè)試劑

橋粒芯糖蛋白3ELISA試劑盒 DSG3免費(fèi)代測(cè)試劑

橋粒芯糖蛋白1ELISA試劑盒 DSG1免費(fèi)代測(cè)試劑
淀粉分支酶(SBE)測(cè)試盒NADP磷酶(NADPase)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

NADP磷酶(NADPase)測(cè)試盒/微量法100管/96樣

NADP蘋(píng)果酶(NADP-ME)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

NADP蘋(píng)果酶(NADP-ME)測(cè)試盒/微量法100管/96樣

NADP-蘋(píng)果脫氫酶(NADP－MDH)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

NADP-蘋(píng)果脫氫酶(NADP－MDH)測(cè)試盒/微量法100管/96樣

NAD激酶(NADK)測(cè)試盒/比色法50T/24樣

NAD激酶(NADK)測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣

NAD激酶(NADK)測(cè)試盒/微量法100管/48樣