酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)測(cè)試盒

商品詳情：
酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)測(cè)試盒測(cè)定意義：

AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族，主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種酰基化和去酰基化反應(yīng)，在基因表達(dá)、代謝和信號(hào)傳導(dǎo)中具有重要作用。

測(cè)定原理：

AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙酰基到丁醇，同時(shí)還原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，測(cè)定412nm吸光度增加速率，來(lái)計(jì)算AAT活性。

自備儀器和用品：

研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。

心肌肌動(dòng)蛋白α1ELISA試劑盒 ACTC1免費(fèi)代測(cè)試劑

心肌鈣黏蛋白ELISA試劑盒 CDHH免費(fèi)代測(cè)試劑

斜方蛋白1ELISA試劑盒 RHOM1免費(fèi)代測(cè)試劑

小異二聚體伴侶ELISA試劑盒 SHP免費(fèi)代測(cè)試劑

小亞基鈣1ELISA試劑盒 CAPNS1免費(fèi)代測(cè)試劑

小細(xì)胞蛋白γELISA試劑盒 PARVγ免費(fèi)代測(cè)試劑

小細(xì)胞蛋白βELISA試劑盒 PARVβ免費(fèi)代測(cè)試劑

小細(xì)胞蛋白αELISA試劑盒 PARVα免費(fèi)代測(cè)試劑

小腦肽4ELISA試劑盒 CBLN4免費(fèi)代測(cè)試劑

小腦肽3ELISA試劑盒 CBLN3免費(fèi)代測(cè)試劑

小腦肽2ELISA試劑盒 CBLN2免費(fèi)代測(cè)試劑

小腦肽1ELISA試劑盒 CBLN1免費(fèi)代測(cè)試劑

小核糖核蛋白多肽CELISA試劑盒 SNRPC免費(fèi)代測(cè)試劑

小根蛋白ELISA試劑盒 ROLT免費(fèi)代測(cè)試劑

小泛素相關(guān)修飾蛋白2ELISA試劑盒 SUMO2免費(fèi)代測(cè)試劑
酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)測(cè)試盒γ/糖化酶比色法檢測(cè)試劑盒 微量法 100管/48樣

γ/糖化酶比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣

ADPG焦磷化酶(AGP）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

ADPG焦磷化酶(AGP）比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣

ADPG焦磷化酶(AGP）比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法25管/24樣

可溶性淀粉合成酶(SSS）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

可溶性淀粉合成酶(SSS）比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣

可溶性淀粉合成酶(SSS）比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法25管/24樣

結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣