兔子前列腺素E2ELISA試劑盒

兔子前列腺素E2ELISA試劑盒

　　 　（1） 酶與抗體的活性 常用瓊脂擴(kuò)散或免疫電泳法，使抗原與抗體形成沉淀線，經(jīng)PBS漂洗1天，再以蒸餾水浸泡1小時(shí)，將瓊脂凝膠片浸于酶底物溶液中著色，如果出現(xiàn)應(yīng)有的顏色反應(yīng)，再用生理鹽水浸泡，顏色仍然不褪，表示結(jié)合物既有酶的活性，也有抗體活性。良好的結(jié)合物在顯色后，瓊擴(kuò)滴度應(yīng)在1:16以上。另一個(gè)測(cè)定方法是用系列稀釋的酶標(biāo)抗體直接以ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒）方法進(jìn)行方陣滴定，此法不僅可以測(cè)定標(biāo)記效果，還可以確定酶標(biāo)抗體的使用濃度。 　　（2） 結(jié)合物的定量測(cè)定 一般是對(duì)結(jié)合物中的酶和IgG進(jìn)行定量測(cè)定。常用紫外分光光度計(jì)于403nm和280nm進(jìn)行測(cè)定，然后按下列公式計(jì)算： 　　酶量（mg/ml）＝OD403×0.42 　　IgG量（mg/ml）＝（OD280－OD403×0.4）×0.94×0.62 　　對(duì)于過(guò)碘酸鈉氧化法制備的標(biāo)記抗體量，按下列公式計(jì)算： 　　IgG量（mg/ml）＝（OD280－OD403×0.34）×0.62 　　已知酶量和IgG量后，即可計(jì)算出標(biāo)記抗體的摩爾（mol）比值。 　　HRP/IgG摩爾比值＝HRP（mg/ml）/IgG（mg/ml）×4 　　結(jié)合物中酶總量＝HRP（mg/ml）×結(jié)合物溶液量 　　結(jié)合物產(chǎn)率＝結(jié)合物中酶總量/標(biāo)記時(shí)加入的酶量×100％ 　　用于ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒）的結(jié)合物的酶量為400（g/ml時(shí)效果一般，為500（g/ml時(shí)效果較好，達(dá) 1000（g/ml時(shí)效果。mol.比值由于結(jié)合物中含的IgG并不*可靠，所以不能作為主要參數(shù)。一般認(rèn)為mol.比值為0.7時(shí)效果一般，1.0時(shí)效果較好，1.5-2.0時(shí)。酶結(jié)合率為 7％時(shí)效果一般，為9％－10％較好，達(dá)30％以上時(shí)。

兔子前列腺素E2 ELISA試劑盒 rabbit Prostaglandin E2,PG-E2 ELISA試劑盒
 

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